SimpleCloningT-vector是一种PCR产物高效TA克隆的专用T载体,它由pUC18载体改造而成,去除了PCR产物插入区域两侧所有的酶切位点。PCR产物克隆后如果使用其两端的酶切位点进行酶切时,T载体上不会有相同的酶切位点影响酶切反应,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。多克隆位点的消除并不影响β-半乳糖苷酶的正常表达,PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白斑筛选,挑选阳性克隆。传统T载体在进行连接时的操作程序是:载体、片段、T4DNALigaseBuffer、T4DNALigase。本制品是在传统模式上将除了插入片段的各成分进行预混,并使其在稳定性、转化子数目、阳性率方面不低于传统模式,使用时只需加入插入片段即可,大大简化了操作过程,降低了配制连接体系过程中的误差和污染率,节省了时间。
规格 - HKT004系列2×pSC-TvectorFastLigationMix
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
HKT004-01A | 2×pSC-T vector Fast Ligation Mix | 20次 | T载体 | 540 |
HKT004-01B | 20次×5 | 2398 |
HKT004系列2×pSC-TvectorFastLigationMix的产品特点
高效:快速连接,15分钟即可完成连接反应。
稳定:-20℃取出反复冻融20次,克隆数目及阳性率不受影响。
快捷:只需加入插入片段在补充去热源水到10μL体系。
HKT004系列2×pSC-TvectorFastLigationMix的使用建议
1)连接使用的PCR片段3'端应带有A末端,如果是使用pfu等高保真聚合酶扩增的不带A末端的平末端片段,不可直接用于进行连接反应。
2)克隆时使用的InsertDNA片段(PCR产物)建议进行切胶回收纯化,否则PCR产物中的短片段DNA、残留引物等杂质都会影响TA克隆效率。
3)转化过程中建议使用ControlInsertDNA做对照,以便在实验出现问题时确定原因。
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